结缔组织是机体的主要构成成分，显示结缔组织各种成分的特殊染色在组织病理学上有很广泛的用途。结缔组织由细胞及细胞间质组成，细胞间质又包括纤维和基质两种成分。
一、Rlissell－Movat改良五色染色法
1．固定10％中性缓冲福尔马林。
2．切片石蜡，6微米。
3．试剂
10％酒精—苏木素溶液（见第15章）
10％三氯化铁溶液（见第15章）
Verhoeff氏碘溶液
碘2克
碘化钾4克
蒸馏水100毫升
碘和碘化钾置于烧瓶中用力摇匀混合，逐渐加蒸馏水，每次20毫升。
Verhoeff氏弹力染色工作液
10％酒精—苏木素25毫升
100％酒精 25毫升
10％三氯化铁25毫升
混匀，加
Verhoeff氏碘溶液25毫升
2％三氯化铁分化液
10％三氯化铁20毫升
蒸馏水80毫升
5％硫代硫酸钠溶液 （见第15章）
3％冰醋酸溶液 （见第15章）
1％阿辛蓝溶液
阿辛蓝8GS1克
蒸馏水97毫升
冰醋酸 3毫升
藏红花—酸性品红贮存液
A液
藏红花 0．1克
蒸馏水 99．5毫升
冰醋酸 0．5毫升
B液
酸性品红 0．1克
蒸馏水 99．5毫升
冰醋酸 0．5毫升
藏红花—酸性品红工作液
A液 80毫升
B液 20毫升
1％冰醋酸溶液 （见第15章）
5％磷钨酸溶液 （见第15章）
藏红花酒精溶液
藏红花 6克
纯酒精 100毫升
充分振摇，藏红花不能完全溶解，放置24小时，使用时滤去沉淀。用后回收。
4．步骤
（1）脱蜡至蒸馏水；
（2）Verhoeff氏弹力染色工作液染15～30分钟；
（3）微温流水冲洗20分钟；
（4）入蒸馏水；
（5）2％三氯化铁液分化。显微镜下检查。弹力纤维清晰。背景灰白时，放切片到蒸馏水中中止反应；
（6）5％硫代硫酸钠处理1分钟；
（7）流水冲洗5分钟；
（8）3％冰醋酸溶液处理3分钟；
（9）1％阿辛蓝处理15～30分钟或直到黏液染成蓝色、肌肉清楚；
（10）温流水彻底冲洗10分钟；
（11）蒸馏水冲洗；
（12）藏红花—酸性品红液染2分钟；
（13）蒸馏水反复冲洗；
（14）1％醋酸溶液中迅速冲洗；
（15）5％磷钨酸处理2次，每次2～5分钟。镜下控制；
（16）1％醋酸溶液冲洗；
（17）纯酒精脱水3次；
（18）藏红花酒精液染15分钟；
（19）纯酒精冲洗切片3次，二甲苯透明2次；
（20）树脂封固。
5．结果
核黑色
弹力纤维黑色
胶原黄色
基质和黏蛋白蓝色至绿色
肌肉红色
纤维素样物质深红色
6．注意事项
（1）避免藏红花液接触到水。盖紧贮存液瓶盖，防止受潮。
（2）染黏液物质前先染弹力纤维，既缩短了染色时间又改善了染色质量。
（3）在第5步，切片在2％三氯化铁溶液中间隔。在每一间隔，甩开切片上残余的三氯化铁溶液，蒸馏水浸泡片刻，光镜检查。待大血管上的弹力纤维能与肌肉区分开时停止分化。
（4）光镜下检查，确定结缔组织是否清晰。在弹力纤维褪色前停止分化。
二、Gomori氏一步三色染色法
1．固定经任何固定液充分固定的组织均可（包括酒精固定的涂片）。
2．切片石蜡，6微米。
3．试剂
Bouin氏固定液 （见第15章）
welgert氏铁苏木素工作液（见第15章）
自来水
Gomorl氏三色染液
苯胺蓝0．6克
亮绿0．3克
冰醋酸1毫升
磷钨酸0．8克
蒸馏水100毫升
1％冰醋酸溶液 （见第15章）
4．步骤
（1）脱蜡至蒸馏水；
（2）入Bouin氏固定液在56℃烤箱放l小时；
（3）流水充分冲洗，直到切片清洁；
（4）铁苏木素工作液染10分钟；
（5）自来水洗；
（6）Gomorl氏三色染液染15～20分钟；
（7）1％醋酸冲洗；
（8）蒸馏水冲洗；
（9）95％精、纯酒精脱水，二甲苯透明，各2次，每次2分钟；
（10）中性树脂封固。
5．结果
肌纤维红色
胶原绿色
核蓝色到黑色
6．注意事项
（1）在第4步中可以用Gomori氏铬苏木素代替Weigert氏铁苏木素。
（2）苯胺蓝可以代替亮绿。
（3）切片可以在Bouin氏液中室温过夜。
（4）如切片太红，可在100毫升1％醋酸（其中加入0．7克的磷钨酸）中分化。
三、MassoIl氏三色染色法
1．固定10％中性缓冲福尔马林、Bouin氏固定剂。
2．切片石蜡，6微米
3．试剂
Bouin氏固定剂 （见第15章）
铁苏木素工作液，welgert氏 （见第15章）
比布里希猩红溶液
1％比布里希猩红溶液90毫升
1％酸性品红水溶液10毫升
冰醋酸1毫升
磷钼酸—磷钨酸溶液
磷钼酸5克
磷钨酸5克
蒸馏水200毫升
苯胺蓝溶液
苯胺蓝2．5克
冰醋酸2毫升
蒸馏水100毫升
亮绿溶液
亮绿5克
蒸馏水250毫升
冰醋酸2．0毫升
1％醋酸溶液
4．步骤
（1）脱蜡至蒸馏水；
（2）如果切片是福尔马林固定的则用Bouin氏固定剂在56℃处理l小时或在室温过夜；
（3）冷却切片10分钟；
（4）流水冲洗切片直到清洁，蒸馏水冲洗；
（5）Welgert氏铁苏木素液染10分钟；
（6）流水冲洗10分钟，蒸馏水冲洗；
（7）比布里希猩红—酸性品红液染15分钟，回收染液。蒸馏水冲洗；
（8）磷钼酸—磷钨酸液分化10～15分钟，检查使胶原的红色消失为止。
（9）苯胺蓝液复染5～10分钟或亮绿液复染1分钟，回收染液，蒸馏水冲洗；
（10）如果复染用的是苯胺蓝，则用1％醋酸水溶液分化3～5分钟；如果用亮绿复染，则用5％磷钨酸液分化15分钟；
（11）95％酒精，纯酒精脱水，二甲苯透明，各2次，每次2分钟；
（12）中性树脂封固。
5．结果
核黑色
肌肉、细胞质、角蛋白红色
胶原蓝色或绿色
6．注意事项
（1）对中枢神经系统切片，染色时间不同：
第7步，比布里希猩红—酸性品红液2分钟；
第8步，磷钼酸—磷钨酸液10～30分钟；
第9步，苯胺蓝液15～20分钟；
（2）从比布里希猩红—酸性品红液中取出时如果胶原仍保留红色，则用磷钼酸—磷钨酸液重复分化。
四、Verhoeff氏弹力纤维染色
1．固定10％中性缓冲福尔马林或其他任何固定液固定好的组织。
2．切片石蜡，6微米。
3．试剂
10％酒精苏木素溶液
10％三氯化铁溶液
Verhoeff氏碘溶液
碘2克
碘化钾4克
蒸馏水100毫升
把碘和碘化钾的结晶放在烧瓶里混合。逐步加蒸馏水，用力振摇，每次20毫升。
Verhoeff氏弹力染色工作液
10％酒精苏木素液 25毫升
100％酒精 25毫升
10％三氯化铁25毫升
混匀后，加
Verhocff氏碘溶液25毫升
2％三氯化铁分化液
10％三氯化铁20毫升
蒸馏水80毫升
VG染液
5％硫代硫酸钠溶液
4．步骤
（1）脱蜡至蒸馏水；
（2）Verhoeft氏弹力染色工作液染15分钟；
（3）微温流水冲洗20分钟；
（4）入蒸馏水；
（5）2％三氯化铁分化，镜检。弹力纤维呈黑色，线条分
明、背景呈灰色；
（6）入5％硫代硫酸钠溶液中1分钟；
（7）流水冲洗5分钟；
（8）入蒸馏水；
（9）VG染液复染1分钟；
（10）95％酒精（2次）、纯酒精（2次）快速脱水，二甲苯透明2次；
（11）中性树脂封固。
5．结果
弹力纤维黑色
核黑色
胶原红色
其他组织结构黄色
6．注意事项
（1）擦干切片的背面。在切片的正面仍有三氯化铁分化液时，低倍下检查。动脉壁上的弹力纤维应为黑色而动脉壁上的肌肉则为灰色。
（2）Van Gieson液中放置时间不能超过1分钟。苦味酸成分可使弹力纤维褪色。
（3）快速经过95％酒精浸洗，以避免褪去Van Gieson液。
五、Van Gieson氏苦味酸酸性品红染色法
1．固定10％中性缓冲福尔马林。
2．切片石蜡，4～6微米。
3．溶液
铁苏木素贮备液，Weigert氏
铁苏木素工作液，Weigert氏
10％酸性品红水溶液
苦味酸饱和水溶液
苦味酸1．2克
蒸馏水100毫升
Van Gieson氏染液
