4.实质脏器的采集无菌采集脏器组织块，放入无菌容器内。每块组织应单独放在无菌容器内，注明日期、组织和动物名称。注意防止组织间相互污染。供组织病理学检查的样品要新鲜、不能冷冻，不要挤压，尽量避免造成人为损伤。取材应包括病灶及周边正常组织，组织块的厚度最好不超过1.5cm，要有切面，取材后应及时固定于10％福尔马林溶液中。如作冷冻切片用，则需将组织块放在0—4℃容器中，尽快送实验室检验。供病毒分离用组织器官样品死后立即采集，直接放入灭菌瓶中，不加防腐剂。若样品不能当天使用，有些可用50％的缓冲甘油（pH7.2的Hank，s平衡盐溶液或PBS配制，含复合抗生素）保存。绝大多数病毒是不稳定的，样品一经采集要尽快冷藏。现场采集样品要尽快用冷藏瓶（加干；冰或水冰）将样品送到实验室检验或置低温冰箱保存。如使用干冰应特别注意将样品严密封好，以防二氧化碳（C02）窜人样品，因为有的病毒对酸很敏感（如口蹄疫病毒）。如无法获得干冰或水冰，可用冷水加氯化铵按3：1的比率倒入冷藏瓶中，溶解后将密封好的样品放入其中。不能得到及时检验的样品，一般要保存于-70℃以下。一般忌放-20℃（该温度对有些病毒活力有影响）。
5.体表样品的采集表皮寄生虫检查，可刮取病变组织碎屑或用透明胶带粘取内耳、耳根及颈背部毛根部皮屑，贴附于载玻片上，供显微镜检查（需尽快进行观察，以免虫体爬出）。产生水泡或皮肤病变的疾病，应直接从病变部位采样。可直接收集病变皮肤的碎屑以及未破裂水泡液、水泡皮等作为样品，液体采集后置离心管内，水泡皮等置于灭菌的50％甘油盐水保存液中低温保存送检（液体没过组织即可）。
6.乳汁样品的采集清洗乳头后采样。乳房先用消毒液洗净（取乳者的手亦应事先消毒），并把乳房附近的毛刷湿，最初所挤的3～4把乳汁弃去，然后再采集lOmL左右乳汁于灭菌试管中。进行血清学检验的乳汁不应冻结、加热或强烈震动。
7.胚胎的采集选取完整、无腐败的胚胎置于冰盒中尽快送抵实验室。如果在24小时内不能将样品送达实验室，需先冷冻后运送。
8.精液、尿液及其他液态样品的采集精液样品用人工方法采集，所采样品应包括“富精，部分；尿液宜在早晨采集，在动物排尿时，用洁净的容器直接接取。也可使用塑料袋，固定在雌畜外阴部或雄畜的阴茎下接取尿液。
采集胆汁、脓、粘液或关节液等样品时，用灭菌吸管、毛细吸管或注射器插入蓄积部位，吸取液体物质，然后将其注入灭菌的试管中送检。
9.粪便样品的采集检查消化系统寄生虫，需采取5—10g新鲜粪便。从体外采集粪便，应力求新鲜。或用拭子小心地插到直肠粘膜表面采集粪便，然后将拭子放入盛有灭菌的50％甘油盐水保存液中送检（如做虫卵检查，应用饱和盐水浮游法或离心集虫法尽快进行）。
10.供显微镜检查的脓、血液、粘液及组织抹片的制备方法先将上述样品置于载玻片上，再用另一玻片推抹或滴加盐水后用另一玻片涂抹，涂片自然干燥后，火焰固定按实验要求进行染色后观察。用组织块作触片时，将组织块的游离面在玻片上轻轻蘸抹即可，（涂布样品切记要薄，如细胞重叠，将影响观察结果）。滴加生理盐水后用做暗视野检查或直接镜检的样品，应立即在显微镜下观察。
11.全脑、脊髓的采集切开颅骨，采取脑、脊髓，做病原检查，可将脑、脊髓浸入50％甘油盐水液中，低温状态下送往实验室。做病理学检查，可固定于10％福尔马林液中送检。
第二节样品的处理
一、病毒检验样品的处理
1.器官组织病料将保存于50％甘油缓冲盐水溶液中的器官组织病料用无菌生理盐水洗2～3次后，细细剪碎后放人乳钵中充分研磨。研磨过程中，逐渐加入pH7.2～7.4的Hank‘s液（含500IU/mL的青、链霉素），最后制成10％～20％的组织悬液。置于-20℃环境迅速冷冻，然后于37℃水浴中立即融化，冻融过程可以反复几次，使细胞内的病毒充分释放。以2000r/min离心10～20min后，吸取上清液，作接种用。
2.鼻咽拭子或直肠拭子将棉拭子迅速置于含有2～5mL中性Hank’。平衡盐溶液（含500IU/ml的青、链霉素）的小瓶中，充分挤压，刷洗棉拭子。必要时可反复冻融3～5次，收集其液体部分，以2000r/min离心10-20min，吸取上清液，作接种用。
3.血液样品用作病毒分离的血液样品，可以是全血也可以是血清，要根据病毒的感染类型而定。采集全血时可加入肝素或枸椽酸钠作为抗凝剂。
4.分泌物或渗出物将采集的分泌物或渗出物用pH7.2～7.4的Hank，s液作3.5倍稀释。这类样品常含有大量细菌，需做除菌处理，可加入青、链霉素各1000～2000IU/Ml，4℃4h或过夜，2000r/min离心20min，吸收上清液，用于接种。病料悬液也可经离心去沉渣后，用细菌滤器过滤除菌，滤过液用于接种。
5.粪便病毒在粪便中的含量较少，所以一般取5～10g以上的新鲜粪便，或直接从肠管内取样。用pH7.2-7.4的Hank，s液将粪便稀释10—20倍，Hank.s液应含有1000～2000IU/mL的青、链霉素和2.5ug/mL的两性霉素B或40ug/mL的制霉菌素，4℃过夜，2000r/min离心20min，取上清液用于接种。
6.无菌的体液胸水、脑脊髓液、心包液和无菌导尿液等可不做任何处理，直接用于接种。
二、细菌检验样品的处理
1.用于细菌分离培养病料的处理严格无菌采取的待检病料，可不经处理直接接种于培养基中，进行分离。对于污染较严重的病料，在接种培养基前，必须根据污染杂菌的程度及性质进行适当处理，然后进行分离培养。
2.加热处理法当怀疑病料中的病原微生物为芽胞菌时，可将待检组织加灭菌生理盐水研磨（液体待检病料则不必）作成1：5～1：10倍的稀释液，置75℃水浴箱中，加热30min，或80℃经15～20min，以杀死微生物和繁殖体（包括杂菌及病原菌），而细菌芽胞仍存活，然后将处理过的待检病料接种到适当的培养基上，即可获得纯培养。
3.接种易感动物把待检病料接种易感动物，待其发病死亡后，取其血液或组织器官材料，接种到培养基上。利用这种方法不但可以从污染的病料中分离出病原菌，而且还可以确定病原菌的致病性和毒力。
4.化学药品处理有些化学药品对某些微生物有极强的抑制力，而对另一些微生物则没有抑制作用或作用很小。因此，可将适宜的化学药品加入培养基中分离微生物。如培养基中加入一定量的龙胆紫则可抑制许多革兰氏阳性菌的繁殖，有利于阴性菌的分离培养。用50％的酒精或0.1％升汞水溶液处理真菌性病料几分钟，再用灭菌水洗涤，就可杀死部分污染的杂菌。
三、用于动物试验样品的处理
1.胸水、脑脊髓液、血液、心包液、尿液和分泌物等。可不做任何处理，直接接种动物。
2.脏器等组织。取被检病料放于无菌研钵中，用灭菌的剪子将组织剪成碎粒。加人灭菌海砂少许再进行磨细，再加人生理盐水少许继续研磨，静置片刻，使悬浮组织下沉，然后用注射器吸取上清液供注射用。如供静脉注射用，常用低速（1700r／min）离心15min，再吸取上清液作注射用。
3.细菌培养物。液体培养物可直接用于注射。固体培养物先用生理盐水或肉汤培养基洗刮菌苔，然后倾于小烧杯中吸取。注意悬液制成后存放时间不能过长。
第三节样品的记录包装与运送
一、样品的记录
送往实验室的样品应有一式二份的送检单，一份随样品送实验室，另一份留送检方备案。样品记录至少应包括以下内容：
1.畜主的姓名和畜禽场的地址；
2.畜禽场（户）里饲养的动物品种及其数量；
3.被感染的动物种类；
4.首发病例和继发病例的日期及造成的损失；
5.感染动物在畜群中的分布情况；
6.死亡动物数、出现临床症状的动物数量及其年龄；
7.临床症状及其持续时间，包括产奶或产蛋的记录，死亡情况和时间，基本病理变化，免疫和用药情况等；
8.饲养类型和标准，包括饲料种类；
9.送检样品清单和说明，包括病料的种类、保存方法等；
10.动物治疗史；
11.要求做何种检测；
12.送检者的姓名、地址、邮编和电话；
13.送检日期等；
14.采样人和被采样单位签章。
二、样品的包装
1.每个组织样品应仔细分别包装，在样品袋或平皿外贴上标签，标签注明样品、样品编号、采样日期等。再将各个样品放到塑料包装袋中。
2.血清、拭子样品装于塑料离心管中，应分别放特定塑盒内。
3.包装袋外、塑料盒及铝盒应贴封条，封条上应有采样人签章，并注明贴封日期，标注放置方向。
三、样品的运送和保存
1.所采集的样品要以最快最直接的途径送往实验室。
2.如果样品能在采集后24h内送抵实验室，则可放在4℃左右的容器中运送。3.只有在24h小时不能将样品送往实验室并不致影响检验结果的情况下，方可将样品冷冻，并维持低温状态运送。
4.根据试验需要决定送往实验室的样品是否放在保存液中运送。
5.要避免样品泄漏。装在试管或广口瓶中的病料密封后装在保温箱内加冰袋运送，要包装或用封口膜防止试管和容器内容物泄漏。如需寄送，装箱时要垫上足够的缓冲材料。
6.制成的涂片、触片、玻片上做好标记，火焰固定，并另附说明。玻片最好放在玻片盒内，在保证不被压碎的条件下运送。所有样品都要标注详细标签。
7.各种样品到达实验室后，应按有关规定冷冻保存。长期保存的样品应超低温冷冻（以－70℃或以下为宜）保存，尽量避免反复冻融。
