2月12日，开慧从长沙迁到武汉，住在督府堤41号。
毛泽东这次北上，是为了主办中央农民运动讲习所。由于农民运动讲习所培养了大批人才，从讲习所毕业的学员大多都成为农民运动的骨干，因此讲习所的规模不断扩大。这一期学员达到800多人，来自全国17个省。毛泽东为讲习所倾注了心血，除讲课外，还经常与学员们谈心，听取他们的建议。此时开慧虽然怀有身孕，但她仍不辞辛苦，为毛泽东准备材料，到学员中了解情况，给毛泽东以极大的支持。由于开慧和蔼可亲，平易近人，学员们都愿意同她交谈，与她交朋友。
这段时间，由于生活条件艰苦，工作又很繁忙，加上怀孕，开慧的身体状况很差。同志们担心她身体会垮下来，劝她注意休息，增加些营养，开慧都拒绝了。她说，我是共产党员，各方面都应该带头，不能搞特殊化。开慧对自己严格要求，对同志却是非常地关心，从工作到生活，只要她能做的，她都会尽力给予帮助。
4月4日，开慧的第三个孩子毛岸龙出生了。
4月12日，蒋介石在上海举起血腥的屠刀，发动了“四一二”反革命政变，疯狂屠杀共产党员和革命群众，使我党蒙受惨重损失。开慧在病房里知道了这个消息，痛苦地流下了眼泪。她再也不能在医院里躺下去了，她既想立刻投入战斗，又极担心毛泽东的安全，于是带着孩子回到了家里。
面对严峻的形势，4月27日到5月6日，党中央在武昌召开了中国共产党第五次全国代表大会。会上，毛泽东和陈独秀进行了激烈的辩论。毛泽东提出了大力建设农民武装、开展土地革命、建立农村政权的正确主张，很多同志表示支持。但掌握中央大权的陈独秀不仅一意孤行，而且对毛泽东进行打击报复，他指使人剥夺了毛泽东的表决权，并把毛泽东排斥在大会领导之外。看到毛泽东日益消瘦的面孔，开慧心如刀绞，她多想替毛泽东分担一部分忧愁啊！
由于陈独秀的错误决策，以及蒋介石的反攻倒算，形势急转直下。广州、北京、长沙等地纷纷发生反革命政变，大批共产党人惨遭杀害。5月7日，夏斗宣部在宜昌叛变，被我叶挺独立师和武汉革命武装击败，毛泽东也派农讲所学员参加了战斗。5月21日，长沙发生“马日事变”，湖南工会和农会组织了十几万工农武装，准备攻打长沙。但陈独秀却从武汉发来命令，要湖南临时省委立即取消攻城计划，说什么攻城会引起纠纷，还说农民不得进行武装斗争，有问题要请国民政府来解决。这简直是痴人说梦！蒋介石已经在人民的头顶上挥舞起大刀了，这位党的总书记却还对国民党寄予厚望。结果，工农武装一撤退，反革命武装就对人民开始了大屠杀，使我党我军蒙受了极大的损失。
在这紧急关头，湖南的共产党员、工农干部想到了毛泽东和开慧，他们纷纷派出代表来到武汉，请毛泽东出主意，想办法。从5月下旬，开慧几乎把全部的精力都放在了接待湖南来的同志上了。她冒着生命危险，把这些同志接进来，又把他们送出去，给他们包扎伤口，给他们送衣送饭。开慧劝他们不要泄气，形势会好转的，而且她和毛泽东不久就会回到湖南来。
正如开慧所说，共产党人并没有被吓倒。
8月1日，周恩来、朱德、刘伯承、叶挺、贺龙等在南昌发动了武装起义，并取得胜利，给人民群众以极大的鼓舞。
8月7日，中国共产党在武汉召开了中央紧急会议。党中央和在会上严厉批评了陈独秀的错误路线，并撤消了他的领导职务。会议采纳了毛泽东的正确建议，即以主要力量发动和组织农民武装斗争，开展土地革命，以革命的武装反对反革命的武装，枪杆子里面出政权。这就是著名的“八七”会议。
会后不久，开慧和毛泽东就回到了湖南。由于敌人搜查很严，毛泽东又是他们重点追捕的对象，因此开慧建议改变住处，从望麓园搬到了北门福寿桥附近的八角门楼，这里离省委所在地的沈家大屋很近，便于工作联系。8月18日，毛泽东以中央特派员的身份，在沈家大屋召开了改组后的湖南省委第一次会议，具体部署了秋收起义的计划。会上毛泽东首先传达了“八七”会议精神，决定在湖南西部一带举行秋收起义，并组成了以毛泽东为书记的前敌委员会。开慧始终关注着事态的发展，并准备时刻投入新的战斗。
