由于泥鳅是分批产卵的，让其自然产卵受精往往产卵率和受精率不高。如采用人工授精，可获得大批量受精卵，效果较自然受精好得多。
人工催产人工授精往往比天然繁殖时间晚1～2个月，长江流域一般在5～6月份、晴天水温较高时进行。这时如培育的亲泥鳅食量突然减少，说明是催产的时机到了。人工授精的地方应在室内，避开阳光直射。
人工催产人工授精的大体过程是：注射催产剂→发情高潮之前取精巢→制备精液→挤卵→同时射入精液→搅拌→漂去多余精液和血污物。为了做到不忙乱有节奏地工作，一般3～5人为一组，操作时动作要迅速、轻巧，避免损伤受精卵。
人工授精的关键是适时授精，否则会影响受精率和孵化率。
（1）人工催产。人工催产是对雌、雄亲泥鳅注射催产素。为做到适时授精，必须根据当时水温和季节准确估计效应时间，以便协调制备精液以及挤卵工作。
（2）人工授精。当临近效应时间之时，要经常检查网箱内亲泥鳅活动，如发现有雌、雄泥鳅到水面追逐激烈，鳃张合频繁呼吸急促时，说明发情高潮来临。轻压雌鳅腹部，若有黄色卵子流出并卵粒分散，说明授精时机已到，应迅速进行授精。
①精液制备。在发情高潮来临之前应及时制备精液。由于泥鳅的精液无法挤出，所以要进行剖腹取精巢。雄泥鳅精巢贴附在脊椎的两侧，为两条乳白色的精巢。剖开腹部寻到精巢，用镊子轻轻地取出精巢，放在研钵中，再用剪刀将其剪碎，最后用钵棒轻轻地研磨，并立即用林格氏液或生理食盐水稀释。一般每尾雄泥鳅的精巢可加入20～50毫升的林格氏液。要避免阳光照射，并防止淡水混入，以保持精子的生命力。精液制备完成，马上进行人工授精。
②人工授精。在规模不大时，可用一白瓷碗，装盛适量清水，一人将成熟雌鳅以毛巾或纱布裹住，露出腹部，以右手拇指由前向后轻压，将成熟卵挤入瓷盆中。另一人用20毫升注射用针筒吸取精液（不装注射针）浇在卵子上。第三个人一手持住大碗轻轻摇晃，另一手用鹅毛轻轻搅拌，使精液充分接触卵子。数秒钟后加入少量清水，激活精子并使卵子充分受精。随即将受精卵进行孵化。
大规模生产时，用500毫升烧杯，加入400毫升林格氏液，以同样的操作组合，尽快将卵挤入，同时用鹅毛搅拌，经4～5分钟后，倒掉上层的林格氏液，添加新林格氏液，洗去血污。把预先配制的精液倒入烧杯中，同时用羽毛搅拌，使精卵充分混合，再将受精卵进行孵化。
