6.2.4全国马鼻疽消灭标准全国所有省（市、自治区）均达到消灭标准。五、布鲁氏菌病防治技术规范布鲁氏菌病（Brucellosis，也称布氏杆菌病，以下简称布病）是由布鲁氏菌属细菌引起的人兽共患的常见传染病。我国将其列为二类动物疫病。
为了预防、控制和净化布病，依据《中华人民共和国动物防疫法》及有关的法律法规，制定本规范。
1.适用范围本规范规定了动物布病的诊断、疫情报告、疫情处理、防治措施、控制和净化标准。本规范适用于中华人民共和国境内一切从事饲养、经营动物和生产、经营动物产品，以及从事动物防疫活动的单位和个人。
2.诊断
2.1流行特点多种动物和人对布鲁氏菌易感。布鲁氏菌属的6个种和主要易感动物见下表：
种主要易感动物
羊种布鲁氏菌（Brucella melitensis）羊、牛牛种布鲁氏菌（Brucella abortus）牛、羊猪种布鲁氏菌（Brucella suis）猪绵羊附睾种布鲁氏菌（Brucella ovis）绵羊犬种布鲁氏菌（Brucella canis）犬
沙林鼠种布鲁氏菌（Brucella neotomae）沙林鼠布鲁氏菌是一种细胞内寄生的病原菌，主要侵害动物的淋巴系统和生殖系统。病畜主要通过流产物、精液和乳汁排菌，污染环境。
羊、牛、猪的易感性最强。母畜比公畜，成年畜比幼年畜发病多。在母畜中，第一次妊娠母畜发病较多。带菌动物，尤其是病畜的流产胎儿、胎衣是主要传染源。消化道、呼吸道、生殖道是主要的感染途径，也可通过损伤的皮肤、黏膜等感染。常呈地方性流行。
人主要通过皮肤、黏膜、消化道和呼吸道感染，尤其以感染羊种布鲁氏菌、牛种布鲁氏菌最为严重。猪种布鲁氏菌感染人较少见，犬种布鲁氏菌感染人罕见，绵羊附睾种布鲁氏菌、沙林鼠种布鲁氏菌基本不感染人。
2.2临床症状潜伏期一般为14~180天。
最显著症状是怀孕母畜发生流产，流产后可能发生胎衣滞留和子宫内膜炎，从阴道流出污秽不洁、恶臭的分泌物。新发病的畜群流产较多；老疫区畜群发生流产的较少，但发生子宫内膜炎、乳房炎、关节炎、胎衣滞留、久配不孕的较多。公畜往往发生睾丸炎、附睾炎或关节炎。
2.3病理变化主要病变为生殖器官的炎性坏死，脾、淋巴结、肝、肾等器官形成特征性肉芽肿（布病结节）。有的可见关节炎。胎儿主要呈败血症病变，浆膜和黏膜有出血点和出血斑，皮下结缔组织发生浆液性、出血性炎症。
2.4实验室诊断
2.4.1病原学诊断
2.4.1.1显微镜检查
采集流产胎衣、绒毛膜水肿液、肝、脾、淋巴结、胎儿胃内容物等组织，制成抹片，用柯兹罗夫斯基染色法染色，镜检，布鲁氏菌为红色球杆状小杆菌，而其他菌为蓝色。
2.4.1.2分离培养
新鲜病料可用胰蛋白月示琼脂面或血液琼脂斜面、肝汤琼脂斜面、3%甘油0.5%葡萄糖肝汤琼脂斜面等培养基培养；若为陈旧病料或污染病料，可用选择性培养基培养。培养时，一份在普通条件下，另一份放于含有5%~10%二氧化碳的环境中，37℃培养7~10天。然后进行菌落特征检查和单价特异性抗血清凝集试验。为使防治措施有更好的针对性，还需做种型鉴定。
如病料被污染或含菌极少时，可将病料用生理盐水稀释5~10倍，健康豚鼠腹腔内注射0.1毫升/只~0.3毫升/只。如果病料腐败时，可接种于豚鼠的股内侧皮下。接种后4~8周，将豚鼠扑杀，从肝、脾分离培养布鲁氏菌。
2.4.2血清学诊断
2.4.2.1虎红平板凝集试验（RBPT）（见GB/T18646）2.4.2.2全乳环状试验（MRT）（见GB/T18646）2.4.2.3试管凝集试验（SAT）（见GB/T18646）2.4.2.4补体结合试验（CFT）（见GB/T18646）2.5结果判定县级以上动物防疫监督机构负责布病诊断结果的判定。2.5.1具有2.1、2.2和2.3时，判定为疑似疫情。
2.5.2符合2.5.1，且2.4.1.1或2.4.1.2阳性时，判定为患病动物。
2.5.3未免疫动物的结果判定如下：
2.5.3.12.4.2.1或2.4.2.2阳性时，判定为疑似患病动物。
2.5.3.22.4.1.2或2.4.2.3或2.4.2.4阳性时，判定为患病动物。
2.5.3.3符合2.5.3.1但2.4.2.3或2.4.2.4阴性时，30天后应重新采样检测，2.4.2.1或2.4.2.3或2.4.2.4阳性的判定为患病动物。
3疫情报告
3.1任何单位和个人发现疑似疫情，应当及时向当地动物防疫监督机构报告。
3.2动物防疫监督机构接到疫情报告并确认后，按《动物疫情报告管理办法》及有关规定及时上报。
4疫情处理
4.1发现疑似疫情，畜主应限制动物移动；对疑似患病动物应立即隔离。
4.2动物防疫监督机构要及时派员到现场进行调查核实，开展实验室诊断。确诊后，当地人民政府组织有关部门按下列要求处理：
4.2.1扑杀
对患病动物全部扑杀。
4.2.2隔离
对受威胁的畜群（病畜的同群畜）实施隔离，可采用圈养和固定草场放牧两种方式隔离。
隔离饲养用草场，不要靠近交通要道，居民点或人畜密集的地区。场地周围最好有自然屏障或人工栅栏。
4.2.3无害化处理
患病动物及其流产胎儿、胎衣、排泄物、乳、乳制品等按照GB16548-1996《畜禽病害肉尸及其产品无害化处理规程》进行无害化处理。
4.2.4流行病学调查及检测
开展流行病学调查和疫源追踪；对同群动物进行检测。
4.2.5消毒
对患病动物污染的场所、用具、物品严格进行消毒。
饲养场的金属设施、设备可采取火焰、熏蒸等方式消毒；养畜场的圈舍、场地、车辆等，可选用2%烧碱等有效消毒药消毒；饲养场的饲料、垫料等，可采取深埋发酵处理或焚烧处理；粪便消毒采取堆积密封发酵方式。皮毛消毒用环氧乙烷、福尔马林熏蒸等。
4.2.6发生重大布病疫情时，当地县级以上人民政府应按照《重大动物疫情应急条例》有关规定，采取相应的扑灭措施。
5预防和控制
非疫区以监测为主；稳定控制区以监测净化为主；控制区和疫区实行监测、扑杀和免疫相结合的综合防治措施。
5.1免疫接种
5.1.1范围疫情呈地方性流行的区域，应采取免疫接种的方法。
5.1.2对象免疫接种范围内的牛、羊、猪、鹿等易感动物。根据当地疫情，确定免疫对象。
5.1.3疫苗选择布病疫苗S2株（以下简称S2疫苗）、M5株（以下简称M5疫苗）、S19株（以下简称S19疫苗）以及经农业部批准生产的其他疫苗。
5.2监测
5.2.1监测对象和方法监测对象：牛、羊、猪、鹿等动物。
监测方法：采用流行病学调查、血清学诊断方法，结合病原学诊断进行监测。
5.2.2监测范围、数量
免疫地区：对新生动物、未免疫动物、免疫一年半或口服免疫一年以后的动物进行监测（猪可在口服免疫半年后进行）。监测至少每年进行一次，牧区县抽检300头（只）以上，农区和半农半牧区抽检200头（只）以上。
非免疫地区：监测至少每年进行一次。达到控制标准的牧区县抽检1000头（只）以上，农区和半农半牧区抽检500头（只）以上；达到稳定控制标准的牧区县抽检500头（只）以上，农区和半农半牧区抽检200头（只）以上。所有的奶牛、奶山羊和种畜每年应进行两次血清学监测。5.2.3监测时间对成年动物监测时，猪、羊在5月龄以上，牛在8月龄以上，怀孕动物则在第1胎产后半个月至1个月间进行；对S2、M5、S19疫苗免疫接种过的动物，在接种后18个月（猪接种后6个月）进行。
5.2.4监测结果的处理按要求使用和填写监测结果报告，并及时上报。判断为患病动物时，按第4项规定处理。
5.3检疫异地调运的动物，必须来自于非疫区，凭当地动物防疫监督机构出具的检疫合格证明调运。
动物防疫监督机构应对调运的种用、乳用、役用动物进行实验室检测。检测合格后，方可出具检疫合格证明。调入后应隔离饲养30天，经当地动物防疫监督机构检疫合格后，方可解除隔离。
5.4人员防护饲养人员每年要定期进行健康检查。发现患有布病的应调离岗位，及时治疗。5.5防疫监督布病监测合格应为奶牛场、种畜场《动物防疫合格证》发放或审验的必备条件。动物防疫监督机构要对辖区内奶牛场、种畜场的检疫净化情况监督检查。
鲜奶收购点（站）必须凭奶牛健康证明收购鲜奶。
6控制和净化标准
6.1控制标准
6.1.1县级控制标准
连续2年以上具备以下3项条件：
6.1.1.1对未免疫或免疫18个月后的动物，牧区抽检3000份血清以上，农区和半农半牧区抽检1000份血清以上，用试管凝集试验或补体结合试验进行检测。试管凝集试验阳性率：羊、鹿0.5%以下，牛1%以下，猪2%以下。补体结合试验阳性率：各种动物阳性率均在0.5%以下。
6.1.1.2抽检羊、牛、猪流产物样品共200份以上（流产物数量不足时，补检正常产胎盘、乳汁、阴道分泌物或屠宰畜脾脏），检不出布鲁氏菌。
6.1.1.3患病动物均已扑杀，并进行无害化处理。
6.1.2市级控制标准全市所有县均达到控制标准。6.1.3省级控制标准全省所有市均达到控制标准。6.2稳定控制标准6.2.1县级稳定控制标准按控制标准的要求的方法和数量进行，连续3年以上具备以下3项条件：6.2.1.1羊血清学检查阳性率在0.1%以下、猪在0.3%以下；牛、鹿0.2%以下。
6.2.1.2抽检羊、牛、猪等动物样品材料检不出布鲁氏菌。
6.2.1.3患病动物全部扑杀，并进行了无害化处理。
6.2.2市级稳定控制标准全市所有县均达到稳定控制标准。6.2.3省级稳定控制标准全省所有市均达到稳定控制标准。6.3净化标准6.3.1县级净化标准按控制标准要求的方法和数量进行，连续2年以上具备以下2项条件：
6.3.1.1达到稳定控制标准后，全县范围内连续两年无布病疫情。
6.3.1.2用试管凝集试验或补体结合试验进行检测，全部阴性。
6.3.2市级净化标准全市所有县均达到净化标准。6.3.3省级净化标准全省所有市均达到净化标准。
6.3.4全国净化标准全国所有省（市、自治区）均达到净化标准。六、牛结核病防治技术规范牛结核病（BovineTuberculosis）是由牛型结核分枝杆菌（Mycobacteriumbovis）引起的一种人兽共患的慢性传染病，我国将其列为二类动物疫病。为了预防、控制和净化牛结核病，根据《中华人民共和国动物防疫法》及有关的法律法规，特制定本规范。
1.适用范围本规范规定了牛结核病的诊断、疫情报告、疫情处理、防治措施、控制和净化标准。本规范适用于中华人民共和国境内从事饲养、生产、经营牛及其产品，以及从事相关动物防疫活动的单位和个人。
2.诊断
2.1流行特点
本病奶牛最易感，其次为水牛、黄牛、牦牛。人也可被感染。结核病病牛是本病的主要传染源。牛型结核分枝杆菌随鼻汁、痰液、粪便和乳汁等排出体外，健康牛可通过被污染的空气、饲料、饮水等经呼吸道、消化道等途径感染。
2.2临床特征：
潜伏期一般为3~6周，有的可长达数月或数年。临床通常呈慢性经过，以肺结核、乳房结核和肠结核最为常见。肺结核：以长期顽固性干咳为特征，且以清晨最为明显。患畜容易疲劳，逐渐消瘦，病情严重者可见呼吸困难。
乳房结核：一般先是乳房淋巴结肿大，继而后方乳腺区发生局限性或弥漫性硬结，硬结无热无痛，表面凹凸不平。泌乳量下降，乳汁变稀，严重时乳腺萎缩，泌乳停止。
肠结核：消瘦，持续下痢与便秘交替出现，粪便常带血或脓汁。
2.3病理变化：在肺脏、乳房和胃肠黏膜等处形成特异性白色或黄白色结节。结节大小不一，切面干酪样坏死或钙化，有时坏死组织溶解和软化，排出后形成空洞。胸膜和肺膜可发生密集的结核结节，形如珍珠状。
2.4实验室诊断
2.4.1病原学诊断
采集病牛的病灶、痰、尿、粪便、乳及其他分泌物样品，作抹片或集菌处理（见附件）后抹片，用抗酸染色法染色镜检，并进行病原分离培养和动物接种等试验。
2.4.2免疫学试验
牛型结核分枝杆菌PPD（提纯蛋白衍生物）皮内变态反应试验（牛提纯结核菌素皮内变态反应试验）（见GB/T18646）。2.5结果判定本病依据流行病学特点、临床特征、病理变化可做出初步诊断。确诊需进一步做病原学诊断或免疫学诊断。
2.5.1分离出结核分枝杆菌（包括牛结核分枝杆菌、结核分枝杆菌）判为结核病牛。
2.5.2牛型结核分枝杆菌PPD 皮内变态反应试验阳性的牛，判为结核病牛。
3疫情报告
3.1任何单位和个人发现疑似病牛，应当及时向当地动物防疫监督机构报告。
