一、外植体的选择与消毒
选取生长健壮、无病虫害的满天星母株为试验材料。切下茎尖和带芽茎段，去除叶片，在饱和洗衣粉水中刷洗后在自来水下冲洗10min，在超净工作台上，将其放入广口瓶中，加0.1%氯化汞溶液，振荡消毒15min，然后用无菌水冲洗3次后备用。
二、培养条件
1.诱导与分化培养
在超净工作台上将消毒处理之后的外植体接种在准备好的外植体诱导培养基中，培养条件控制在温度25℃±2℃，光照时间12h/d～14h/d，光照强度120μmol·m-2·s-1～200μmol·m-2·s-1，继代周期30d，其外植体诱导培养基分别如下。
MS+6-BA0.5mg/L+IAA0.5mg/L（芽诱导培养基）
MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.1mg/L（增殖培养基）
MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.1mg/L（壮苗培养基）
（以上培养基如无特别说明，其蔗糖浓度均为3%，琼脂浓度0.6%，pH值5.8～6.0。）
2.生根培养
当不定芽长至2cm～3cm时，将其转入生根培养基中进行生根培养，其培养条件控制在温度25℃±2℃，光照时间12h/d～14h/d，光照强度120μmol·m-2·s-1～200μmol·m-2·s-1，其生根培养基：1/2MS+IBA1.0mg/L+NAA0.02mg/L，如无特别说明，1/2MS培养基仅为大量元素减半，其蔗糖浓度均为1.5%，琼脂浓度0.6%，pH值5.8～6.0。
三、试管苗移栽
当株高长至2.5cm～3.5cm，根长为2cm左右，粗壮且具较多白色根毛时进行试管苗的移栽。移栽前，打开培养瓶盖，将苗瓶置于温室炼苗6d～7d后，然后用镊子或筷子小心取出试管苗，洗净根部琼脂，用800倍代森锰锌溶液浸泡1min～2min，根部蘸适当浓度的生根剂，移栽于上层为3cm厚纯净河沙，下层为草炭∶蛭石∶珍珠岩=5∶3∶2基质中，移栽后每7d喷洒多菌灵灭菌，相对湿度保持在70%～80%，温度控制在22℃±2℃。
【思考题】
1.满天星生根培养中培养基的配制有什么特殊要求？
2.如何判断生长是否正常的愈伤组织？
3.愈伤组织有哪些分类和表现？
